cdna苹果手机

       下面,我将为大家展开关于cdna苹果手机的讨论,希望我的回答能够解决大家的疑问。现在,让我们开始聊一聊cdna苹果手机的问题。

1.ggps是什么基因?

2.如图1是以鲜苹果汁为原料生产果酒及苹果醋的过程简图及有关装置图,据图回答:(1)某同学用图2中A装置进

3.酵母双杂交文库构建和筛选-宝吉生物

4.植物cdnapcr过程中对于多糖类的酶有哪些

5.race和ethnicity有什么区别?

6.哪位兄弟姐妹有山东大学生命科学学院的专业课笔记或真题

cdna苹果手机

ggps是什么基因?

       类胡萝卜素是自然界分布最广、种类最丰富的色素,在植物、动物、藻类及蓝细菌中都有重要的生物功能。为研究甘薯薯肉色突变体农大辐14的类胡萝卜素合成发生突变的分子机理,本研究分析了突变体块根膨大过程中类胡萝卜素含量的变化,并进行类胡萝卜素合成相关基因片断的克隆。主要结果如下:1、比色法测定结果表明,突变体中类胡萝卜素含量比对照提高5~10倍。随着块根的膨大,突变体中类胡萝卜含量明显增加,而对照类胡萝卜素含量没有明显的变化。2、根据双子叶植物类胡萝卜素合成结构基因氨基酸序列的保守区域设计简并引物,扩增出甘薯类胡萝卜素合成结构基因(GGPS、PSY、PDS、ZDS、LYC-b)的cDNA片断,所获序列同其他植物类胡萝卜素合成结构基因序列同源性非常高。3、通过RACE技术克隆了PDS基因的全长cDNA,序列长为2,128 bp, 具有完整的开放阅读框架,编码572个氨基酸,与其他植物PDS基因高度同源。RT-PCR检测表明,在突变体和对照块根膨大过程中,PDS基因是组成性表达的。实时荧光定量PCR分析结果表明,随着块根的膨大,突变体和对照PDS基因的表达逐渐下降。在块根每个发育阶段,突变体PDS基因的表达量均比对照大。4、cDNA-AFLP分析结果表明,突变体和对照块根中的大部分基因表达是一致的。寻找到32条突变体和对照表达有明显差异的基因片断,测定其中6个片断的基因序列。Blast结果表明, Fragment 2 部分序列同梨的推测与衰老有关的基因(AY436773.1)一致性达100%; Fragment 3 部分序列同苹果的Ttg1类似蛋白基因(AF220203.1)一致性达89%。Fragment 4 部分序列同拟南芥腺苷酸激酶基因(BT004398.1)一致性达81%。

如图1是以鲜苹果汁为原料生产果酒及苹果醋的过程简图及有关装置图,据图回答:(1)某同学用图2中A装置进

       一. 选择题(每小题3分,共30分)

        1. 的绝对值是( )

        A. B. C. D.

        2. 当 时,代数式 的值是( )

        A. 2 B. 0 C. 4 D. 1

        3. 要使分式 有意义,则 的取值范围是( )

        A. B. C. D.

        4. 抛物线 与 轴的交点坐标是( )

        A. B. C. D.

        5. 如图所示,已知DE//BC,AD = 3, BD = 6,EC = 4,则AE长为( )

        A. 2 B. 4 C. 1 D. 3

        6. 用地砖铺地面,下列哪种正多边形地砖不能铺满地面

        A. B.

        C. D.

        7. 已知抛物线 的图象与x轴有两个交点,则 的取值范围是( )

        A. B. C. D.

        8. 某商店举办有奖销售活动,办法如下:凡购满100元者得奖券一张,多购多得,每10000张奖券为一个开奖单位,设特等奖1个,一等奖50个,二等奖200个,那么买100元商品中一等奖的概率应是( )

        A. B. C. D.

        9. 如图所示,一块直角三角形板ABC( )的斜边AC与一个半径为1的圆轮子相靠,则CD等于( )

        A. B. C. 1 D.

        10. 如图所示,在平行四边形ABCD中,AC=4,BD=6,P是BD上任一点,过P作EF//AC,与平行四边形的两条边分别交于点E、F,设BP= ,EF= ,则能反映 与 之间关系的图象为

        A. B.

        C. D.

       二. 填空题(每小题3分,共30分)

        11. 计算: .

        12. 若 ,则 .

        13. 我国某城市有人口523800人,用科学计数法表示为 .

        14. 已知 是方程 的两个实数根,则 .

        15. 如果两圆半径分别是2和3,圆心距是1,则两圆位置关系是 .

        16. 抗“非典”期间,个别商贩将原来每桶价格 元的过氧乙酸消毒液提高20%后出售,市政府及时采取措施,使每桶的价格在涨价后下降15%,那么现在每桶的价格是 元.

        17. 如图所示, 为等腰直角三角形, ⊙A与BC相切,则图中阴影部分的面积为 .

        18. 给出下列程序:

       (输入 ) (立方) (×k) (+b) (输出)

        且已知当输入的 值为1时,输出值为1;输入的 值为-1时,输出值为-3.则当输入的 值为 时,输出值为 .

        19. 观察下列各式:

        请你将猜想到规律用自然数 ,表示出来: .

        20. 如图所示,四边形OABC中,OA=OB=OC, 是 的4倍,若 ,则 .

       三. 解答题(共60分)

        21. (8分)计算:

        22. (8分)解方程:

        23. (10分)为防水患,在漓江上游修筑了防洪堤,其横截面为一梯形(如图所示),堤的上底宽AD和堤高DF都是6米,其中

       (1)求证:

       (2)如果 ,求堤的下底BC的长。

        24. (10分)如图所示,已知⊙ 与⊙ 相交于A、B两点,P是⊙ 上一点,PB的延长线交⊙ 于点C,PA交⊙ 于点D,CD的延长线交⊙ 于点N。

       (1)过点A作AE//CN交⊙ 于点E,求证:PA=PE

       (2)连结PN,若PB=4,BC=2,求PN的长。

        25. (12分)某中学新建了一栋4层的教学大楼,每层楼有8间教室,进出这栋大楼共有4道门,其中两道正门大小相同,两道侧门大小也相同。安全检查中,对4道门进行了测试:当同时开启一道正门和两道侧门时,2分钟内可以通过560名学生;当同时开启一道正门和一道侧门时,4分钟内可以通过800名学生。

       (1)求平均每分钟一道正门和一道侧门各可以通过多少名学生?

       (2)检查中发现,紧急情况时因学生拥挤,出门的效率将降低20%,安全检查规定,在紧急情况下全大楼的学生应在5分钟内通过4道门安全撤离,假设这栋教学大楼每间教室最多有45名学生。问:建造的这4道门是否符合安全规定?请说明理由。

        26. (12分)已知如图,点A在 轴上,⊙A与 轴交于B、C两点,与 轴交于点D(0,3)和点E(0,-1)。

       (1)求经过B、E、C三点的二次函数解析式;

       (2)若经过第一、二、三象限的一动直线切⊙A于点P(s,t),与 轴交于点M,连结PA并延长与⊙A交于点Q,设Q点的纵坐标为 ,求 关于 的函数关系式,并观察图形写出自变量 的取值范围;

       (3)在(2)条件下,当 时,求切线PM的解析式,并借助函数图像,求出(1)中抛物线在切线PM下方的点的横坐标 的取值范围。

       四. 选做题(共10分)

        27. 已知如图,在 中,AB=AC, ,BM=NM,BN=a,则点N到边BC的距离等于 。

        28. 已知关于 的方程 的两个实数根为 、 ,且 。求证 。

        答案

       一.1.B 2. C 3. D 4. C 5. A 6. C 7. C 8. A 9.D 10.A

       二. 11. 12. 13. 4.

        15. 内切 16. 1.02a 17. 18. 19.

        20.

       三.解答题

       21.

       22.

       23. (1)略 (2)21米

       24. (1)证明,连结AB,

        四边形AEPB是⊙ 的内接四边形,

        在⊙ 中,

        又 AE//CN,

       (2)连结AN,四边形ANPB是⊙ 的内接四边形,

        由(1)可知

        又 。

        又 在⊙ 中,由割线定理: ,

        .

       25.解:(1)设平均每分钟一道正门可以通过 名学生,一道侧门可以通过 名学生,由题意得

        解得

        答:平均每分钟一道正门可以通过学生120名,一道侧门可以通过学生80名。

       (2)这栋楼最多有学生4×8×45=1440(名)。

        拥挤时5分钟4道门能通过5×2(120+80)(1-20%)=1600(名)。

        ,

        建造的4道门符合安全规定。

       26. 解:

       (1) 为⊙A的直径,

       设经过B、E、C三点的抛物线的解析式为

        则 ,解得

        。

       (2)过点P作PF⊥Y轴于F,过点Q作QN⊥Y轴于N。

        ,F点纵坐标为 ,

        N点的纵坐标为

       动切线PM经过第一、二、三象限,观察图形可得

        关于 的函数关系式为

       (3)当 时,Q点与C点重合,连结PB。

        为⊙A的直径, ,即PB⊥ 轴。

        将 代入

        得

        设切线PM与 轴交于点I,则AP⊥PI

        在 与 中,

       点坐标为(0,5),设切线PM的解析式为

        点的坐标为 解得

        切线PM的解析式为 设切线PM与抛物线 交于G、H两点,由 可得

        因此,G、H的横坐标分别为 、 。根据图象可得抛物线在切线PM下方的点的横坐标 的取值范围是

       27. 设

        设为 ,作ND⊥BC于D,在 中,

        在 中,

       28. 只要证 即可。

        法二: 的抛物线,当 时,

        相应的 值为:

        抛物线的顶点 必在 轴或 轴的下方。

        而抛物线的开口向上,

        抛物线与 轴的两交点必在1的两侧或同在1这个点。

       1. 3/7 × 49/9 - 4/3

       2. 8/9 × 15/36 + 1/27

       3. 12× 5/6 – 2/9 ×3

       4. 8× 5/4 + 1/4

       5. 6÷ 3/8 – 3/8 ÷6

       6. 4/7 × 5/9 + 3/7 × 5/9

       7. 5/2 -( 3/2 + 4/5 )

       8. 7/8 + ( 1/8 + 1/9 )

       9. 9 × 5/6 + 5/6

       10. 3/4 × 8/9 - 1/3

       11. 7 × 5/49 + 3/14

       12. 6 ×( 1/2 + 2/3 )

       13. 8 × 4/5 + 8 × 11/5

       14. 31 × 5/6 – 5/6

       15. 9/7 - ( 2/7 – 10/21 )

       16. 5/9 × 18 – 14 × 2/7

       17. 4/5 × 25/16 + 2/3 × 3/4

       18. 14 × 8/7 – 5/6 × 12/15

       19. 17/32 – 3/4 × 9/24

       20. 3 × 2/9 + 1/3

       21. 5/7 × 3/25 + 3/7

       22. 3/14 ×× 2/3 + 1/6

       23. 1/5 × 2/3 + 5/6

       24. 9/22 + 1/11 ÷ 1/2

       25. 5/3 × 11/5 + 4/3

       26. 45 × 2/3 + 1/3 × 15

       27. 7/19 + 12/19 × 5/6

       28. 1/4 + 3/4 ÷ 2/3

       29. 8/7 × 21/16 + 1/2

       30. 101 × 1/5 – 1/5 × 21

       31.50+160÷40 (58+370)÷(64-45)

       32.120-144÷18+35

       33.347+45×2-4160÷52

       34(58+37)÷(64-9×5)

       35.95÷(64-45)

       36.178-145÷5×6+42 420+580-64×21÷28

       37.812-700÷(9+31×11) (136+64)×(65-345÷23)

       38.85+14×(14+208÷26)

       39.(284+16)×(512-8208÷18)

       40.120-36×4÷18+35

       41.(58+37)÷(64-9×5)

       42.(6.8-6.8×0.55)÷8.5

       43.0.12× 4.8÷0.12×4.8

       44.(3.2×1.5+2.5)÷1.6 (2)3.2×(1.5+2.5)÷1.6

       45.6-1.6÷4= 5.38+7.85-5.37=

       46.7.2÷0.8-1.2×5= 6-1.19×3-0.43=

       47.6.5×(4.8-1.2×4)= 0.68×1.9+0.32×1.9

       48.10.15-10.75×0.4-5.7

       49.5.8×(3.87-0.13)+4.2×3.74

       50.32.52-(6+9.728÷3.2)×2.5

       1.[(7.1-5.6)×0.9-1.15] ÷2.5

       2.5.4÷[2.6×(3.7-2.9)+0.62]

       3.12×6÷(12-7.2)-6 (4)12×6÷7.2-6

       4. 3/7 × 49/9 - 4/3

       5. 8/9 × 15/36 + 1/27

       6. 12× 5/6 – 2/9 ×3

       7. 8× 5/4 + 1/4

       8. 6÷ 3/8 – 3/8 ÷6

       9. 4/7 × 5/9 + 3/7 × 5/9

       10. 5/2 -( 3/2 + 4/5 )

       11. 7/8 + ( 1/8 + 1/9 )

       12. 9 × 5/6 + 5/6

       13. 3/4 × 8/9 - 1/3

       14. 7 × 5/49 + 3/14

       15. 6 ×( 1/2 + 2/3 )

       16. 8 × 4/5 + 8 × 11/5

       17. 31 × 5/6 – 5/6

       18. 9/7 - ( 2/7 – 10/21 )

       19. 5/9 × 18 – 14 × 2/7

       20. 4/5 × 25/16 + 2/3 × 3/4

       21. 14 × 8/7 – 5/6 × 12/15

       22. 17/32 – 3/4 × 9/24

       23. 3 × 2/9 + 1/3

       24. 5/7 × 3/25 + 3/7

       25. 3/14 ×× 2/3 + 1/6

       26. 1/5 × 2/3 + 5/6

       27. 9/22 + 1/11 ÷ 1/2

       28. 5/3 × 11/5 + 4/3

       29. 45 × 2/3 + 1/3 × 15

       30. 7/19 + 12/19 × 5/6

       31. 1/4 + 3/4 ÷ 2/3

       32. 8/7 × 21/16 + 1/2

       33. 101 × 1/5 – 1/5 × 21

       34.50+160÷40

       35.120-144÷18+35

       36.347+45×2-4160÷52

       37(58+37)÷(64-9×5)

       38.95÷(64-45)

       39.178-145÷5×6+42

       40.812-700÷(9+31×11)

       41.85+14×(14+208÷26)

       43.120-36×4÷18+35

       44.(58+37)÷(64-9×5)

       45.(6.8-6.8×0.55)÷8.5

       46.0.12× 4.8÷0.12×4.8

       47.(3.2×1.5+2.5)÷1.6

       48.6-1.6÷4= 5.38+7.85-5.37=

       49.7.2÷0.8-1.2×5= 6-1.19×3-0.43=

       50.6.5×(4.8-1.2×4)= 1.运送29.5吨煤,先用一辆载重4吨的汽车运3次,剩下的用一辆载重为2.5吨的货车运。还要运几次才能完?

       2.一块梯形田的面积是90平方米,上底是7米,下底是11米,它的高是几米?

       3.某车间计划四月份生产零件5480个。已生产了9天,再生产908个就能完成生产计划,这9天中平均每天生产多少个?

       4.甲乙两车从相距272千米的两地同时相向而行,3小时后两车还相隔17千米。甲每小时行45千米,乙每小时行多少千米?

       5.某校六年级有两个班,上学期级数学平均成绩是85分。已知六(1)班40人,平均成绩为87.1分;六(2)班有42人,平均成绩是多少分?

       6.学校买来10箱粉笔,用去250盒后,还剩下550盒,平均每箱多少盒?

       7.四年级共有学生200人,课外活动时,80名女生都去跳绳。男生分成5组去踢足球,平均每组多少人?

       8.食堂运来150千克大米,比运来的面粉的3倍少30千克。食堂运来面粉多少千克?

       9.果园里有52棵桃树,有6行梨树,梨树比桃树多20棵。平均每行梨树有多少棵?

       10.一块三角形地的面积是840平方米,底是140米,高是多少米?

       11.李师傅买来72米布,正好做20件大人衣服和16件儿童衣服。每件大人衣服用2.4米,每件儿童衣服用布多少米?

       12.3年前母亲岁数是女儿的6倍,今年母亲33岁,女儿今年几岁?

       13.一辆时速是50千米的汽车,需要多少时间才能追上2小时前开出的一辆时速为40千米汽车?

       14.小东到水果店买了3千克的苹果和2千克的梨共付15元,1千克苹果比1千克梨贵0.5元,苹果和梨每千克各多少元?

       15.甲、乙两车分别从A、B两地同时出发,相向而行,甲每小时行50千米,乙每小时行40千米,甲比乙早1小时到达中点。甲几小时到达中点?

       16.甲、乙两人分别从A、B两地同时出发,相向而行,2小时相遇。如果甲从A地,乙从B地同时出发,同向而行,那么4小时后甲追上乙。已知甲速度是15千米/时,求乙的速度。

       17.两根同样长的绳子,第一根剪去15米,第二根比第一根剩下的3倍还多3米。问原来两根绳子各长几米?

       18.某校买来7只篮球和10只足球共付248元。已知每只篮球与三只足球价钱相等,问每只篮球和足球各多少元?

       1) 178-145÷5×6+42 420+580-64×21÷28

       2) 89+456-78

       3) 5%+. 3/7 × 49/9 - 4/3

       4) 9 × 15/36 + 1/27

       5) 2× 5/6 – 2/9 ×3

       6) 3× 5/4 + 1/4

       7) 94÷ 3/8 – 3/8 ÷6

       8) 95/7 × 5/9 + 3/7 × 5/9

       9) 6/2 -( 3/2 + 4/5 )

       10) 8 + ( 1/8 + 1/9 )

       11) 8 × 5/6 + 5/6

       12) 1/4 × 8/9 - 1/3

       13) 10 × 5/49 + 3/14

       14) 1.5 ×( 1/2 + 2/3 )

       15) 2/9 × 4/5 + 8 × 11/5

       16) 3.1 × 5/6 – 5/6

       17) 4/7 - ( 2/7 – 10/21 )

       18) 19 × 18 – 14 × 2/7

       19) 5 × 25/16 + 2/3 × 3/4

       20) 4 × 8/7 – 5/6 × 12/15

       21) 7/32 – 3/4 × 9/24

       22) 1、 2/3÷1/2-1/4×2/5

       23) 2-6/13÷9/26-2/3

       24) 2/9+1/2÷4/5+3/8

       25) 10÷5/9+1/6×4

       26) 1/2×2/5+9/10÷9/20

       27) 5/9×3/10+2/7÷2/5

       28) 1/2+1/4×4/5-1/8

       29) 3/4×5/7×4/3-1/2

       30) 23-8/9×1/27÷1/27

       31) 8×5/6+2/5÷4

       32) 1/2+3/4×5/12×4/5

       33) 8/9×3/4-3/8÷3/4

       34) 5/8÷5/4+3/23÷9/11

       35) 1.2×2.5+0.8×2.5

       36) 8.9×1.25-0.9×1.25

       37) 12.5×7.4×0.8

       38) 9.9×6.4-(2.5+0.24)(27) 6.5×9.5+6.5×0.5

       39) 0.35×1.6+0.35×3.4

       40) 0.25×8.6×4

       41) 6.72-3.28-1.72

       42) 0.45+6.37+4.55

       43) 5.4+6.9×3-(25-2.5)2×41846-620-380

       44) 4.8×46+4.8×54

       45) 0.8+0.8×2.5

       46) 1.25×3.6×8×2.5-12.5×2.4

       47) 28×12.5-12.5×20

       48) 23.65-(3.07+3.65)

       49)(4+0.4×0.25)8×7×1.25

       50) 1.65×99+1.65

       51) 27.85-(7.85+3.4)

       52) 48×1.25+50×1.25×0.2×8

       53) 7.8×9.9+0.78

       54) (1010+309+4+681+6)×12

       55) 3×9146×782×6×854

       56) 15×7/8+6.1-0.60625

       57) 3/7 × 49/9 - 4/3

       58) 8/9 × 15/36 + 1/27

       59) 12× 5/6 – 2/9 ×3

       60) 8× 5/4 + 1/4

       70) 6÷ 3/8 – 3/8 ÷6

       71) 4/7 × 5/9 + 3/7 × 5/9

       72) 5/2 -( 3/2 + 4/5 )

       73) 7/8 + ( 1/8 + 1/9 )

       74) 9 × 5/6 + 5/6

       75) 3/4 × 8/9 - 1/3

       76) 7 × 5/49 + 3/14

       77) 6 ×( 1/2 + 2/3 )

       78) 8 × 4/5 + 8 × 11/5

       79) 31 × 5/6 – 5/6

       80) 9/7 - ( 2/7 – 10/21 )

       81) 5/9 × 18 – 14 × 2/7

       82) 4/5 × 25/16 + 2/3 × 3/4

       83) 14 × 8/7 – 5/6 × 12/15

       84) 17/32 – 3/4 × 9/24

       85) 3 × 2/9 + 1/3

       86) 5/7 × 3/25 + 3/7

       87) 3/14 ×× 2/3 + 1/6

       88) 1/5 × 2/3 + 5/6

       89) 9/22 + 1/11 ÷ 1/2

       90) 5/3 × 11/5 + 4/3

       91) 45 × 2/3 + 1/3 × 15

       92) 7/19 + 12/19 × 5/6

       93) 1/4 + 3/4 ÷ 2/3

       94) 8/7 × 21/16 + 1/2

       95) 101 × 1/5 – 1/5 × 21

       96) 0+160÷40 (58+370)÷(64-45)

       97) 1120-144÷18+35

       98) 347+45×2-4160÷52

       99)(58+37)÷(64-9×5)

       100) 95÷(64-45)

酵母双杂交文库构建和筛选-宝吉生物

       (1)酵母菌的代谢类型是异养兼性厌氧型;酒精可以用酸性的重铬酸钾溶液检测;该同学每隔12h左右就要将瓶盖拧松一次,但又不打开,这样做的目的是及时排出CO2气体,同时防止酵母菌进行有氧呼吸和发酵液被杂菌污染.

       (2)逆转录是以mRNA为模板合成DNA的过程,因此要逆转录获得cDNA,因此从该丝状真菌中获取淀粉酶基因的mRNA;获取目的基因后进行大量扩增,再将其插入到质粒上以构建基因表达载体,并导入酿酒酵母菌体内,以期得到能迅速分解淀粉的酿酒酵母菌.要检测酿酒酵母菌是否合成了淀粉酶,可采用抗原-抗体杂交法.

       (3)为筛选出能高效利用淀粉的转基因酿酒酵母菌,将该工程菌接种在以淀粉作为唯一碳源的固体平板培养基上,培养一定时间后,加入碘液;淀粉酶能催化淀粉水解,形成透明圈,因此最终应选择透明圈大的菌落进一步纯化培养.

       (4)为了了解纯化培养过程种群数量的变化,某同学连续7天测定恒定体积和浓度的培养液中酵母菌种群数量,需要用7支试管来培养并持续分别测定可以避免前一次吸取酵母菌培养液对以后测定酵母菌数量的影响.

       A、将适量干酵母放入装有一定浓度葡萄糖溶液的试管中,在适宜条件下培养,A正确;

       B、应振荡摇匀后,用吸管从试管中吸取培养液,B错误;

       C、应先盖上盖玻片,再在血球计数板中央滴一滴培养液,C错误;

       D、用滤纸吸除血球计数板边缘多余培养液,D正确;

       E、将计数板放在载物台中央,待酵母菌沉降到计数室底部,在显微镜下观察、计数,E正确.

       故选:ADE.

       (5)制备固定化酵母细胞的操作中,最关键的步骤是配制海藻酸钠溶液.酶分子很小,容易从包埋材料中漏出,因此制备固定化酶时不宜用此方法.用CaCl2溶液处理的目的是有利于形成凝胶珠(Ca2+与海藻酸钠反应形成不溶于水的海藻酸钙凝胶).

       (6)果醋制作过程中使用到的微生物是醋酸杆菌,温度需要控制在30-35℃范围内.

       故答案为:

       (1)异养兼性厌氧型?酸性重铬酸钾及时排出CO2气体,以及防止酵母菌进行有氧呼吸和发酵液被杂菌污染.

       (2)mRNA基因表达载体抗原-抗体杂交

       (3)以淀粉作为唯一碳源透明圈大

       (4)避免了前一次吸取酵母菌培养液对以后测定酵母菌数量的影响 ADE

       (5)配制海藻酸钠溶液酶分子很小,容易从包埋材料中漏出有利于形成凝胶珠(Ca2+与海藻酸钠反应形成不溶于水的海藻酸钙凝胶)

       (6)醋酸杆菌?30-35

植物cdnapcr过程中对于多糖类的酶有哪些

       “自1989年Field等人建立了第一个基于酵母的细胞内检测蛋白相互作用的系统以来,酵母双杂交系统已经越来越多的应用于鉴定新的蛋白与蛋白相互作用,鉴定蛋白级联底物以及鉴定突变对蛋白与蛋白结合的影响等。有文献统计,目前已知的蛋白质相互作用至少有一半是通过酵母双杂交实验发现的!” 而文库筛选结果直接由文库质量的好坏所决定,构建出高质量的文库是得到好的筛选结果的关键因素。

        我们拥有13年的文库构建经验,已完成数千个各类文库构建,所采用的技术以及试剂盒均为市场上质量最好的文库构建试剂,保证所构建的每一个文库各项指标均为市场上最高标准,我们构建文库的成功率为98%以上。关于我们的文库构建产品,我们承诺的指标如下,各项指标在国内各家公司里是最高的。

        上海宝吉结合多年的文库构建经验,强势推出“All-Direct”文库构建技术,我们的产品较其他构建方法(主要有takara的SAMRT方法和invitrogen的gateway方法),技术和质量上都具有极大的优势。

        关于我们的文库构建产品,我们承诺的指标如下,各项指标在国内各家公司里是最高的:

        原始文库库容量大于1*10^7CFU;

        平均插入片段大于1200bp;

        克隆阳性率大于95%。

        ? 1.我们是采用同源重组的方法构建文库,没有经过任何的内切酶切割和连接过程,确保不会出现基因被酶切切断的情况,能够保证基因的完整性,而Clonetech的是用酶切连接的方式构建的。

        ? 2.由于我们采用的是重组的方式把cDNA重组到载体上,相对clonetech的SMART的T4连接酶的方法效率要高的多,我们承诺原始库的库容量在1*10^7以上。而且重组的方式假阳性很低,我们这里有的客户一次测3万个克隆,都没有出现一个空载的情况,我们承诺阳性率大于98%,这是酶切连接的方法远远无法比拟的。

        ? 3.Clonetech的SMART方法是用PCR的方法合成第二链的,由于PCR的选择性抑制及竞争性扩增,这样就会造成基因冗余度非常高,低丰度的基因PCR扩增不到,会丢失掉,长片段的基因也会丢失掉,另外会造成重复序列非常多,特别是起始的RNA样本量少的情况(比如5ug RNA以下就需要进行15个循环以上的PCR扩增,大大降低文库质量),,大大降低文库包含的基因数量,而我们的cDNA合成方法是用多种酶在16度恒温的条件下直接合成第二链的,这样就完全忠于样本自身的基因情况,不会人为的改变样本内的基因情况以及基因大小,大大提到文库的质量。

        4.我们是采用的一种高质量的反转录酶,该反转录酶是公认的最好的反转录酶,较clonetech的反转录酶具有反转录温度高(55摄氏度反转,clonetech的反转录酶是使用42度反转,较高的温度可以打开RNA的二级结构,可以获得更长的cDNA),反转录效率和cDNA长度要好的多。我们承诺文库的平均插入片段在1.3Kbp以上,最低长度也在1Kbp以上,而clonetech的SMART方法构建出来的文库一般只有几百BP。

        文库构建流程:

        1.RNA提取

        2.mRNA提取

        3.cDNA的酶促法合成

        4.cDNA连接接头

        5.cDNA按长度分离

        6.cDNA与酵母双杂交文库载体(pGADT7或者pDEST22)进行all-direct重组

        7.重组产物电转化

        8.文库检测以及质粒提取

        3.1 All-direct方法与SMART方法的比较与优势

        3.2? All-direct方法与Gateway方法的比较与优势

        25个工作日内,如需转化酵母延长15个工作日。

        备注1:该酵母文库可以选择增加均一化处理步骤,我们使用DSN法均一化方法,可以构建出高质量的均一化酵母杂交文库,可以大大减少后续酵母筛选的工作量和筛选效率等。

        客户构建指定的酵母双杂交cDNA文库,由客户提供组织、细胞或总RNA给我们即可:

        细胞样本:细胞数量大于1*10^7

        动物样本:大于1g

        植物样本:大于2g

        总RNA:大于200ug

        目前我们已经成功完成数千个不用样本的文库构建,主要客户为中国科学院上海植物生理生态研究所、上海交通大学、浙江大学、浙江省农科院、山东省农科院等多家单位完成酵母双(单)杂交文库构建服务,物种包括人、小鼠、大鼠、水稻、拟南芥、牡丹、稻飞虱、苹果、油菜、小麦、贝壳、葡萄、真菌等。

        我们是国内极少数能同时提供文库构建和文库筛选的公司,对于酵母双杂交筛选服务,您只需要提供诱饵基因序列即可,我们会进行以下工作,筛选的报价为3万元整:

        1.诱饵载体的测序验证以及构建到双杂交筛选载体上

        2.诱饵基因的自激活检测,检测通过后继续下一步实验。

        3.诱饵质粒转化酵母细胞,验证合格后再转化文库质粒

        4.酵母筛选和3AT条件优化

        5.筛选结果的测序

        6.筛选结果的回转验证

        7.筛选结果递交:包括筛选报告,筛选结果的测序结果和blast结果,筛选结果克隆的质粒实物。

        9.1.如何选择合适的文库构建方法进行建库?

        ※ 我们是市场上唯一可以同时提供3种文库构建方法的公司,这也足以看出我们公司的技术实力。

        ※ 3种方法的比较如下:

        ? 1) Clonetech 的SMART方法,该方法基本是被淘汰的,我们上文有详细的技术比较,其唯一的好处就是RNA的起始量可以很小,一般只需要几ug即可,该方法成本很低,一般不建议选择。

        ? 2) Invitrogen的方法,该方法质量上较SMART方法要好很多,其对试剂的质量要求也很高,必须全部使用invitrogen的原厂试剂。我们全部使用invitrogen公司试剂进行构建,且做了一些技术改进,提高了文库质量。该方法对起始的RNA要求较高,建议起始用量是大于200ug。但该方法有一个严重的缺点,就是需要进行两次重组才能得到酵母文库,而多一次重组就会多一次文库扩增过程,会严重影响文库质量。在上文中有详细的技术比较和介绍。

        ? 别的使用该方法建库的公司,只能完全使用商业化的试剂盒构建文库,没有做任何改进。且由于进货渠道的原因,试剂盒内的有些试剂他们是买不到的,质量就会大打折扣。比如DH10B 电转化感受态细胞,这个感受态细胞转化效率比国产的高出100倍以上。这个感受态细胞需要具有很多的海关批文才能买到,其他公司由于没有相关资质,是无法进口的。

        ? 3) All-Direct专利方法,这个是我们的独家专利方法,是在invitrogen方法上做了重要改进,保留了其优点(不用PCR扩增,文库保真度高),去除了其需要经过两次重组的缺点,大大提高文库质量。平均长度较invitrogen方法可以提高200bp,库容量可以提高10倍以上。该方法对RNA的要求量和invitrogen方法一样。

        9.2.宝吉生物提供的酵母双杂文库有哪些产品内容?

        ※ 我们提供的文库产品,包含了文库质量(大于200ug)以及大肠杆菌文库甘油菌。同时可以选择提供转化到酵母细胞的文库甘油菌,我们会提供100只转化到酵母细胞的文库甘油菌,可以做100次的文库筛选。

        ※ 其中文库质粒可以使用共转的方法进行文库筛选,酵母细胞文库甘油菌可以使用maiting的方法进行文库筛选,根据老师的实验习惯可以自由选择,结果没有任何差异的。

        9.3.如何检测文库质量?

        ※ 对于文库的质量,一个简单的金标准就是,样本内的所有基因都在文库里,且基因要有一半以上的全长基因,这个文库就是合格的。

        ※ 对于文库的检测,可以针对我们交付的产品,做以下几个方面的检测:

        根据老师的样本信息,选择3-5个低拷贝的基因,设计合成引物,以我们提供的文库质粒为模板,进行PCR扩增,如果低拷贝的基因都能扩增出来,高拷贝的就不会丢失,文库质量即可以判断为合格。

        ※ 对于我们提供的大肠杆菌文库甘油菌,可以进行梯度稀释后铺板培养,第二天计算库容量,同时挑取单克隆进行PCR扩增和测序检测,以判断插入片段长度和空载率。

        9.4.如何评价文库质量?

        ※ 文库质量的关键指标,主要是文库库容、空载率及插入片段平均长度。

        ※ 文库的原始库容肯定是越高越好,我们公司承诺的是大于1*10^7的库容量,这个是原始库容量,也就是没有经过任何扩增过程,直接转化出来的库容量。比其他公司承诺的1*10^6的库容量要高10倍以上,下面详细解释下库容量的高低对文库质量的影响:

        ※ 生物样本,除了低等生物,目前研究比较多的物种,比如人,大鼠,小鼠,其基因数在5*10^4左右,文库至少得100倍覆盖,也就是库容至少需要5*10^6以上。

        ※ 对于植物样本,其基因数量比人的大很多,比如水稻样本,其基因数量为人的2-3倍,小麦样本,其基因数量为人的5-6倍,这样就需要更多的文库库容量。对于水稻样本,需要覆盖100倍的基因数,要求的文库原始库容量是大于1*10^7以上。市场上别的公司提供的文库最多只能覆盖10倍左右,这么低的覆盖度,必然造成大量基因的丢失。

        ※ 对于有的公司宣传的,库容量不是越高越好,这绝对是不负责任的忽悠,为自己的文库质量不合格找不合理的借口。

        ※ 对于插入基因长度,别的公司一般平均长度就在800bp左右,我们公司可以承诺做到1200bp以上,这个差距是巨大的,下面再 详细介绍下插入片段长度对文库质量的影响:

        ※ 一般的一个功能基因,其一般长度会在200个氨基酸以上,也就是编码区在600bp碱基以上,装入文库的基因,除了编码区,还会有5’UTR区,3‘UTR区以及polyA区域,这几个部分加起来,基因的长度一般至少会在1000bp以上。由于文库是个混合物,会存在竞争性抑制,短的基因过多,势必会影响长度基因的比例,以及长的基因的表达丰度。

        ※ 我们的文库产品,插入片段平均长度会在1200bp以上,最短的会在1000bp左右。对于文库筛选,不是说只要有基因的一个片段就可以了,蛋白质的功能需要多种因素的参与,如果插入基因过短,筛选到的结果只是一个基因片段,甚至是靠近polyA的一小段基因,这个结果的可行度在哪里?基本都可以认为是假阳性的结果的。

        ※ 对于有些公司宣称的,文库的基因插入片段不是越长越好,其实是对客户的极其不负责任和不合理的忽悠,只是因为自己没有技术做到更长的片段长度,而找的理由。

        9.5. Mating和共转两种筛库方法哪种好?

        共转和maiting两种方法,结果是一样的,只是一个文库质粒转到酵母细胞的方法,对于后续的文库筛选没有任何区别的,可以根据老师的实验习惯,自由选择的。

race和ethnicity有什么区别?

       最佳答案

       植物中的水解酶和裂解酶的区别是:

       水解酶 蛋白水解酶 解酶是催化水解反应的一类酶的总称(如胰蛋白酶就是水解多肽链的一种水解酶),也可以说它们是一类特殊的转移酶,用水作为被转移基团的受体。

       裂解酶也称裂合酶类 裂合酶类(或称不久裂解酶类 lyases)催化从底物上移去一个基团而形成双键的反应或其逆反应。

       裂解酶种类:

       例如:二磷酸酮糖裂合酶(EC4.1.2.3习惯名为醛缩酶),苹果酶裂合酶(EC4.1.1.1习惯名为丙酮酸脱羧酶)柠檬酸裂合酶(EC4.1.3.7习惯名为柠檬酸合成酶)。

哪位兄弟姐妹有山东大学生命科学学院的专业课笔记或真题

       区别如下:

       1、race主要是从人种上,也就是体貌特征来区分的不同的race的。这个词多用于指人种,跟人的长相、体形这些有关系。

       2、而ethnicity这个词是按文化区分的。这个跟人种没有太大关系,而跟语言、宗教、文字、起源这些有关系。

扩展资料

       race释义

       英 [re?s] 美 [res]

       n.

       赛跑; 民族; 人种; 竞争

       v.

       参加比赛; 使比赛; 快速移动; 剧烈跳动

       ethnicity

       n. 种族地位,种族特点,种族渊源;

       [例句]He said his ethnicity had not been important to him。

       他说他的种族渊源对他向来都不重要。

如何对一个物种的基因组dna进行pcr啊?比如说是苹果树的dna。我刚开始学pcr,请详细教一下。

       只有01年以前的

       95生化

       一. 名词 基因文库 cDNA文库 PCR 胆汁肝肠循环 DNA双螺旋

       二. 问答

       1. 辨认化合物结构、命名,并说明主要生理(Camp、VitC、Cgmp、FDP)

       2. 根据三大代谢反应过程,填写有关结构式、名称、关键酶

       3. 根据蛋白质的酶解产物,写出一级结构

       三.1.试述Adr调节物质代谢的基础

       2.根据酶促反应的动力学公式进行有关计算

       3.述DNA损伤修复的机理

       4. 用同位素标记C3 、C4,试问该同位素能在软脂酸中出现吗?为什么

       5. 维生素B族各辅酶的化学名称和作用

       6. 简述基因工程的步骤。

       96生化

       1. 磷脂酶在体内代谢的交汇点

       2. 参与DNA复制的酶及因子

       3. 以胰岛素为例,说明蛋白质合成后的加工修饰过程

       4. 计算km及Vmax

       5. Southern blot

       6. PCR

       7. Adr调节糖代谢的机制

       97 生化

       别构酶

       氧化磷酸酶

       Hogness-box

       嘌呤核苷酸循环

       酶促反应动力学计算题:甘油上C2标记后,合成葡萄糖,则糖上哪几个C可能被标记

       NAD与NADP的区别

       ATP的来源与去路

       一炭单位

       试述基因工程

       嘌呤,嘧啶环结构

       CNMP结构

       柠檬酸—丙酮酸循环

       苹果酸—天冬氨酸穿梭

       鸟氨酸循环

       98生化

       一.名词 内在蛋白与外周蛋白 米氏酶与变构酶 多功能酶与多功能酶复合体 脱氢酶与氧化

       酶

       二.问答

       1. 计算km,利用米-曼方程

       2. tRNA转录后的加工

       3. 基因工程中目的基因的制备方法有什么?

       4. 用15N标记的丙氨酸饲料饲养动物,则动物有哪些产物组织中发现15N,述其机制

       5. 镰刀形贫血的分子机制是什么,如何推断

       6. 维生素A.D的生理功能和相应机制

       三.填图:225页图10-6 尿素循环

       99生化

       一.名词:5*6分/个 蛋白质变性与核酸变性 苹果酸-天冬氨酸穿梭 半保留复制 初级胆汁

       酸与次级胆汁酸 蛋白聚糖与糖蛋白 亮氨酸拉链 锌指

       二.参与DNA复制的酶和因子及其作用(起始、解链、解旋过程)

       三.hnRNA与mRNA杂交后出现空泡原因

       四.低血糖昏迷与氨昏迷生化机制

       五.HOL代谢

       六.卵磷脂合成过程及作用

       七.RNA的分类、功能

       八.何为化学修饰调节,其意义为何

       九.ATP合酶的结构及各部分功能

       十.PBR322的结构特点

       2000年

       一、名词解释

       1 Southern blot and Northern blot

       2 端粒,端粒酶

       3 解链温度,增色反应

       4 逆转录,cDNA

       二、问答

       1 遗传密码的发现,并举例说明

       2 14C标记G合成脂肪酸时,14C在奇数位还是偶数位上

       3 LDH与LDHS

       4 Km

       5 胰岛素转录,翻译,加工

       6 丙氨酸→丙酮酸→乙酰CoA 代谢

       7 CaM结构,作用

       8 胆红素代谢

       山大生科院考研的一点总结 附考研成功经历(申精)

       您所查看的帖子来源于考研加油站考研论坛(bbs.kaoyan.com) 热心人请解答:

       问题1

       复试各项内容分数有何作用?

       问题2

       复试里是不是只有专业复试成绩加入总分?初试权重 复试权重一般是怎样的?(七三开?)

       山大 生科院 微生物专业为例:

       初试内容:政治 外语 专业1 专业2

       最高分: 79 + 79 +139 +137 = 434

       复试线: 340分(有单科成绩限制)

       录取最高分:417(经过复试计算,具体方法本人不清楚)数据引自斑竹精华贴!

       复试内容:

       1.体检

       2.外语测试(含听力)耳机自备 150分钟

       3.心理测试 90分钟

       4.专业复试

       附1:生科院复试方案

       生科院院将按照上线人数和招生计划1:1.2的比例进行复试。复试时各专业将加试一门专业课,加试科目均为笔试,满分100分,60分及格。面试(口试)也按100分计分,60分及格。

       笔试科目:略

       面试内容:复试进行口试,主要对考生的知识、实验技能知识、外语口语、分析问题能力和反应灵敏性等进行综合考察(面试时最好带上大学期间的实验报告,供参考)。

       拟录取排名:

       录取成绩=初试成绩÷5×初试权重+复试成绩×复试权重

       (复试成绩包含笔试成绩和面试成绩)。

       附二:生物考研全攻略之山东大学篇(转载自5432考研论坛,原作者内斯塔)

       初试篇

       在寒假过年的时候就已经定下了要考山大,本来是想考北大的,可是当时感觉各方面的状态还达不到考北大的要求,也是为了把握大一些,最终还是确定了离家比较近的山东大学。山大的生物在全国高校排前十,实力还是比较强的,尤其是他的微生物是数一数二的。兴趣的缘故最终选择了细胞专业,初试每个专业考得都一样,包括微生物专业。两门专业课是生物化学和细胞生物学。生化指定了王镜岩的三版和沈同的二版,不过只看三版就足够了,三版已经把二版都包括了,没必要再花那个时间。细胞指定的是韩老的分子细胞生物学和翟中和的细胞生物学,两本都很经典,山大学的是前者。我主要看了老韩那本,翟的基本没看,其实应该看看的,如果时间允许,今年好几个题都是翟那本书上的,韩那本书讲的比较简单,以至于当时一看感觉蒙了,没有一道大题有把握拿满分,不过结果还可以,细胞132分。

        生化是从暑假开始复习的,刚开始就是对着笔记把书先过一遍,不过我觉得自己看的还是比较快,有些小字都没看,事实证明看了也没多少用,看过一遍后感觉有些知识都记起来了,看的同时做了山大的生化习题集(这本书挺好,一定要搞到都是些基本知识,还有原题,虽然就那么几分)然后就进行第2遍,这一遍就是对着辅导班的笔记有针对性地看了(从我们这届开始没有辅导班了,看的师姐的笔记),上面没有的内容就没看,这遍之后就开始把试题看了一遍,其实虽然看了两遍,但是一看题还是觉得好多都不会,这种感觉很正常,好多同学都这样,所以没必要怀疑自己。接下来再看第三遍的同时把历年的真题处理了一下,这时候已经11月底了,不会的就问老师,最后把上面所有的都搞定了,考原题的概率很少,因为手头上的是89-02的生化题,最近三年开始题库出题,市面上没有03-05的(据我所知,很难搞到,市面上没有流传),所以重了也没什么意思,不过大家都搞不到也很公平。这时候把一些生化的问答题何名解也整理了一下,建议大家这样做,对后来背诵很有好处。我觉得考山大生化没必要作课后题,不过你愿意做有时间也可以,反正我一道没做,除了同学问我的时候看一下。一遍比一遍看得快,复习就是不断的过,最后的时候一周就可以把两本书看一遍,所以说复习了四遍也没那么可怕,生化题难度适中吧,没有很变态的题,做过习题集,把历年真题看好了,考120应该没问题,当时就一到试验题没把握,是电泳的,最后考了134,比预期的高一些。糖一点也没考,脂类就考了酸败的名词解释,维生素和激素,光合作用一般也是不考得,大家可以不看,保险可以大体了解一下。

       细胞由于和当时自己学的不是一本书,所以暑假前就已经开始先过一遍了,边看边划,到9月份开学,一编终于结束了,细胞的复习过程后面和上面所讲的生化的大体相当,只不过细胞没有习题集,要整理的问答题多一些,建议大家把历年的问答题都整理一下,非常有帮助,今年我预测的一道关于染色体的就考到了,不过当时记得不是很轻了,在看书的过程中自己总结比较好,其实也不麻烦,就那么几个重点。细胞不考得章节主要是发育那张的前7节,从再生开始考,还有后面的进化那章也不用看。别的都要看一下,细胞题难度也不大,感觉就比期末难一点,考120应该没有问题

       复试篇

       把这次山大复试情况来个全程回顾,相信对于以后考山大的师弟师妹也有帮助。

       3.30日

       今天是复试正式开始的第一天,任务只有一个就是去学校报到,程序很简单,就是把准考证,身份证和学生证拿给工作人员看看,核对以下,他们在盖上“已审核”的章,交过钱后领走一张复试表(面试的时候要交的)。我本以为一大早就会有很多人,其实没想象中的那么可怕,我快八点才到晶体所,排队等候的人也就不过20个,还好还好,可是一会儿功夫那场面就不得了了,人已经排到了很远,都拐了两个弯了,庆幸来的比较早。报完道就去自习了,准备即将到来的笔试。

       3.31日

       今天的重头戏是查体,由于老校没有校医院,所以他们查体也要到新校这边来,人数自然要多一些,我以为和上次差不多时间去就好了,所以虽然6:30就醒了,可是一直到7点才起,当我走出宿舍(我住好友的16号楼宿舍,就在校医院旁边)一看,天!那场景太可怕了,人都快到宿

       舍楼了,等吧,一会儿人有多了起来,好多人不自觉,插队的也有,居然又从旁边弄出了一队,唉!太过分了。排了好久,总算是等到了,先是交钱,除了报名的100查体还要另交45,一点也不严格,除了查血的时候严一些(最后要检查针眼),别的感觉就是走走过场,当我排身高体重轮到我的时候,老师居然问我平时的身高体重,也没看就填上了我说的数据,视力更是指到5.1就不往下了。到12点总算是结束了所有的项目,其实下午来人数会少很多,真该下午来。吃过饭后下午的任务是去学院报道,要把报的导师填表,如果要调专业的话也要这时候注明,还要填英语四六级的通过情况,大部分人都通过了六级,换专业的并不是很多。

       4.1日

        今天是愚人节,不过并没有心情像以往那样骗人,因为今天要迎来英语的笔试和心理测试,虽说应与只记听力的分数,心理测试不算分,不过自己还是很重视。听力的速度非常快,间隔就2.3秒,题型是和4.6级一样的,20个题做完后,感觉一般,有一些都是听完凭着回忆写上去的。估计至少能12分吧。别的题型和考研改革前差不多,难度也差不多,作文是关于人类生存问题的,不是很难写。接下来是心理测试,其实就是填量表,也没什么,四份答题卡,每做完一份,再发给下一份,5.30总算是考完了,4个半小时可真痛苦,只有一个感觉,累!不过晚上还要去自习,因为明天还有重头戏—遗传学笔试。

       4.2日

       今天要进行的是遗传学笔试,是复试中最重要的两项之一,所以不敢大意,早上进考场之前一直在背,生物分两个考场,微生物单独在一个屋,其余专业在另一个屋,题目的难度还可以,应该拉不开分,没有那种很变态的题,不过有几个的确不好答,我全答上了,当然有些是蒙的,交完卷子走出教室,真的感觉轻松了很多,因为接下来就只有面试了,也不用在背那么多东西了,面试还是要看平时的积累。下午晚上都没有上自习,和好朋友们一起吃了饭,也算告别了,因为明天的面试完了就要离开济南了。

       4.3

       今天是周一,也是在济南复试的最后一项面试开始的日子,生科院的面试是排在下午进行的,大部分院是在上午,其实这没什么,我觉得还好,因为昨天玩过后,今天还有时间在背背自我介绍,大体再过一遍。分组情况是上午才贴出来的。微生物自己就分了好多组,其余的则是一个专业一组,我被分到细胞组第二个出场,本来我以为我的初试第一,可能会最后一个出场,结果不是按那个分的,是打乱随机分的,无所谓了,早说完了早走,不过紧张还是多少有一点的。下午一点半面试开始,首先是组长张老师给我们细胞组开了会,说了一些要求,让我们不要紧张,正常发挥,然后第一个人就进去了。我们剩下的则在一个实验室里等着,在等的过程中,旁边一个女生和我说话,一问还是大师姐,是我们学校00级的。过了会儿第一个人回来了,轮到我了。面试组由五个老师组成,所在的地方不大,老师是围成一个圈坐的,大家里的都很近。老师们看上去都很和蔼,所以没什么可怕的。首先是英文的自我介绍,我觉得自己的口语还算可以,毕竟当过翻译,结束后,老师说准备得不错,心里松了口气。下面就是问题开始了,先是问我做过哪些遗传试验,我就说了几个,其中有一个是植物染色体的加倍和观察,老师然后就问我关于加倍的问题,我毕业论文就是做的马铃薯的染色体加倍,所以这个问题很轻松,老师可能看我说得那么流利也有些惊讶,运气帮忙了。接下来的问题是关于如何在实验中合作,发挥最好效果,我觉得答得也还可以。后面老师又问了关于细胞微丝的观察的实验,还好中午扫过,也顺利打了出来。走出门,可算是松了口气,感觉发挥得太好了,嘿嘿,第一应该到手了。晚上和几个兄弟一起吃了个送行饭,回去就睡了。

       做个总结吧,山大的生物总体上不难考,关键是对自己一定要有信心,踏踏实实的复习,不要迷信所谓的市面上的题库。多动手自己整理,别放过任何一个可能考的地方,今年考了个mpf,就没答好,其实比较基本就是翟那本书上的,别想当然。

       都说山大黑,可能个别院是黑,不过生科院不黑,我是外校的照样初试复试都考了细胞的第一,不要害怕,相信自己,一定可以成功的,微生物竞争激烈些,做好心理准备,今年要了45个,25个保送,考的只有5个公费(不含委培),细胞要了15个,六个保送,三个公费(不含委培),初试前没必要找导师,知道成绩后可以联系一下。复试也不能轻视,要认真备战,不管你初试有多牛。最后祝大家07年考研成功!

       首先看你研究的基因组是不是已经测序了,如果是的话就方便了,去NCBI的FTP数据库下载基因组序列或者选择genome数据库输入名称就能查到,FASTA格式保存。推荐前一种方法,可以下载.gbk文件,里面有所有已知基因的注释,用记事本就能打开看。再设计引物,FTP在首页最下面。如果研究未测序物种,就从同源性较高的其他物种寻找类似基因进行测序,以纤维素酶基CesA因为例,我原来克隆过这个,先从模式植物水稻中找到这个基因序列设计引物,当然如果在水稻或其他物种中已有人克隆了这个基因就可以直接用他的引物,因为同源性高一般来讲容易成功。其实最主要就是明确要克隆哪个基因,然后找到序列就能设计,或者用别人的引物,自己加以改进。至于引物设计软件比较权威的就是Primer Premier 5和oligo,前一种比较简单容易上手,后一种功能非常强大,稍微复杂一些,根据情况选择,当然如果不想动脑筋现在也有很多在线设计程序,谷歌一下就能搜到,把目标序列输进去默认参数点GO就OK了。其实设计引物也是一门技术活,有很多法则,网上也能找到。设计的好事半功倍,至于PCR其实没什么好学的,多做几次就会了,后面就是熟练的过程,等的时间比做的时间多。还有一点就是一般做真核生物通常都是提RNA反转cDNA来做,这样避免了内含子,因为真核生物内含子还是占了相当大的部分。得到外显子后其实就可以了,如果真的要完全克隆也可以用genewalk等特殊的酶来做,我也很久没做了,可能现在试剂更好了呵呵。

       好了,关于“cdna苹果手机”的话题就讲到这里了。希望大家能够通过我的讲解对“cdna苹果手机”有更全面、深入的了解,并且能够在今后的工作中更好地运用所学知识。